检测原理

孔雀石绿快速检测试纸卡应用了竞争抑制免疫层析的原理，样本中的孔雀石绿在流动的过程中与胶 体金标记的特异性单克隆抗体结合，抑制了抗体和 NC 膜检测线（T 线）上的孔雀石绿—BSA 偶联物 的结合，从而导致检测线颜色的变化。

样品收集和前处理

实验过程中，用红色标记笔进行标记，黑色标记笔含有结晶紫，会对该实验造成污染鱼、虾样本前处理方法：

（1）用均质器均质组织样本；

（2）称取 1.00.05g  均质物至 10ml 新聚苯乙烯离心管中，加入 1ml 去离子水，涡动 2min，加入 100  l孔雀石绿提取剂 1，再加入 1 瓶孔雀石绿提取剂 2，涡动 2min，3000g以上，室温（20-25℃）离心5min； 

（3）取上清液 1ml 上清液至 10ml 新聚苯乙烯离心管中，加入 50μ l 孔雀石绿氧化剂,涡动 15s，于 50～60℃水浴氮气或空气流下吹干；

（4）加入 0.3ml 样品复溶液涡动溶解 3min，取 100  l 用于分析。

操作步骤

（1）从原包装中取出试剂桶，打开后取出所需数目的微孔试剂和试纸卡，并做好标记。请在 60min 内尽快使用。所需微孔试剂取出后，请立即盖好试剂桶盖，防止受潮。

（2）用微量移液器吸取 100 l 待检样本溶液于微孔中，缓慢抽吸且充分与微孔中试剂混匀。

（3）室温（20~25℃）孵育 3min 后，吸取混匀液约 100ul垂直滴于加样孔（S 孔）中。

（4）液体流动时开始计时，反应 5min，根据示意图判定结果，其他时间判定无效。