【孔雀石绿快速检测试剂盒使用注意事项】
1.检测样本若浑浊应过滤后使用.
2.现场检测出的阳性样品应采用孔雀石绿速测试剂盒(Ⅱ型) 进行确认或采用液相色谱法测定。
3.孔雀石绿标准工作液的使用:本试剂盒提供的标准工作液可提供初学者训练。标准工作液浓度为75ug/ml,用前可取水50mL加入1滴标准工作液即得到稀释到0.075ug/mL的孔雀石绿溶液。取15ml稀释液通过富集柱,富集柱的填料中有明显的绿色出现.
孔雀石绿快速检测试剂盒概要
孔雀石绿是一种带有金属光泽的绿色结晶体,又名碱性绿、严基块绿、孔雀绿,其既是杀真菌剂,又是染料,易溶于水,溶液呈蓝绿色。长期以来,渔民都用它来预防鱼的水霉病、鳃霉病、小瓜虫病等,而且为了使鳞受损的鱼延长生命,在运输过程中和存放池内,也常使用孔雀石绿。研究显示,孔雀石绿在鱼内残留时间很长,且其具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用,鉴于此,许多国家均将孔雀石绿列为水产养殖禁用药物。
孔雀石绿快速检测试剂盒采用竞争酶标免疫法,可经济、快速地检测鱼、虾等样品中的孔雀石绿、隐性孔雀石绿、结晶紫等残留。本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品,能大限度地减少操作误差和工作强度。
孔雀石绿检测试剂盒采用间接竞争ELISA方法,同时把隐性孔雀石绿氧化成孔雀石绿,检测鱼、虾以及鱼池或鱼缸水样中的总的孔雀石绿(Malachite Green ,MG),试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标记物、抗体、标准品及其他配套试剂组成。检测时,加入标准品或样品溶液,样本中的孔雀石绿和酶标板上预包被偶联抗原竞争抗孔雀石绿抗体,加入酶标记物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含孔雀石绿含量成负相关,与标准曲线比较即可得出样本中孔雀石绿的残留量。
【样品处理】
一、 水样:用滴管直接吸取水样进行检测。
二、组织样(虾要去掉头和壳后*洗净,鱼要去鳞后洗净)
1、取切碎的一定量的组织样本,用均质器均质;
2、称取3g已均质样本至15ml离心管中;加入2ml提取剂A,3ml提取剂B,一管氧化剂,在漩涡震荡仪上充分振荡混匀3min,或手摇5min,4000r/min离心5min。
3、取上清1ml于5ml离心管中,加两滴助溶剂。
4、摇晃均匀后,65℃水浴下,氮(空)气吹干。
5、加入0.2ml底物复溶液溶洗涤离心管(冲洗完成后立即进行步骤6,间隔时间切勿超过3分钟)。
6、吸取待检样本溶液0.1ml(约三滴)于金标微孔中,用复溶液滴管轻轻吹打至孔内红色物质*溶解,等待反应5分钟。
【使用步骤】
1.测试前先完整阅读使用说明书,使用前将试剂板和待检样本溶液回复至室温(20℃-30℃);
2.从原包装袋中取出检测卡,水平放置于观察者正面(打开后立即使用);
3.吸取金标微孔中的所有溶液加至加样孔中(见下图),加样后开始计时;
4.结果应在 5 - 8 分钟读取,其他时间判读无效。