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对黄曲霉毒素荧光定量检测卡检测原理及试验方法进行说明
点击次数:401 发布时间:2018-12-22
  黄曲霉毒素荧光定量检测卡主要的结构为二呋喃环及香豆素。目前已发现的20多种黄曲霉毒结构之中,常见的有 AFB1、AFB2、AFG1、AFG2,其中黄曲霉毒素 B1(AFB1) 毒性zui强,被国际癌症研究机构IARC划定为 IA类致癌物。由于黄曲霉和寄生曲霉在自然界的分布很广,而且很多食品基质本身的湿度为菌落的繁殖和毒素的产生提供了有利条件,农作物在田间受到黄曲霉的污染,收割后贮藏过程中如温度和湿度适宜,黄曲霉孢子会大量繁殖产生更多的毒素,在粮食和饲料的贮藏过程中不可避免产生毒素。
 
  黄曲霉毒素M1(AFM1) 时间分辨荧光免疫层析定量检测卡应用竞争抑制免疫层析的原理,样本中若含有AFM1,则在侧向移动的过程中会与荧光微球标记的特异性单克隆抗体反应,抑制抗体和NC 膜检测线上AFM1 - MSA 偶联物的结合。随着样本中AFM1 含量的升高,结合于检测线上的抗体量减少,相应的检测线荧光强度也随之变弱。使用专用时间分辨荧光免疫层析检测仪读数,可定量的测出样本中AFM1 的含量。
 
  黄曲霉毒素荧光定量检测卡试验方法:
 
  1、样品的前处理:
 
  取具有代表性的待测样品500g,用小型粉碎机粉碎1min后过20目筛,收集过筛的细小样品。称取1.0±0.02g过筛的样品于10mL离心管中,加入5mL提取液,用漩涡混匀仪震荡5min(或者摇床振荡10min)后,4000RPM离心1min,取上清。
 
  2、检测过程:
 
  取50μL离心上清液加入500μL样品稀释液中,用漩涡混匀器混匀3-5s,然后取100μL加入到黄曲霉毒素B1荧光定量快速检测卡的加样孔中,置于37℃恒温孵育器中温育10min后,将试纸条插入荧光免疫定量分析仪中读数,即为样品的实际检测浓度。当检测值大于5000μg/kg时,可用提取液将离心上清液稀释5倍后再进行检测,所得读数值乘以对应的稀释倍数即为终的检验结果。
 
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