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黄曲霉毒素免疫亲和柱在操作上主要分以下三个流程
点击次数:158 发布时间:2020-12-07
  黄曲霉毒素免疫亲和柱适合于和HPLC、LC-MS及AFB1酶免分析试剂盒结合使用,定量检测AFB1。适用于谷物、食品、茶叶、饲料、中药材等样本中的AFB1净化处理,提高样品的纯度,纯化后的样品可用不同的分析方法测定。

  测定原理:
  本产品测定的基础是抗原抗体反应,抗AFB1的单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的AFB1经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过AFB1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,AFB1与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。后采用甲醇洗脱AFB1,然后进行相关分析。

  黄曲霉毒素免疫亲和柱的操作流程:
  1、样品处理:参照GB 5009.22-2016中各法,对样品进行处理;
  2、净化:以GB 5009.22-2016 为例说明;
  a、柱子预处理:取出黄曲霉毒素免疫亲和柱,恢复至室温(22-25℃),将上端塞子取出,打开下端堵头,将柱内保存液流掉至高于凝胶上界面3-5mm处,停止流液;
  b、加样:加入处理好的样品液过柱,打开下端堵头,调节流速支1-2滴/秒,弃去流出液。注:大米、玉米、小麦、花生及其制品、植物油脂:加处理好样品15ml酱油、食醋:加处理好样品10ml;
  c、大米、玉米、小麦、花生及其制品、植物油脂样品淋洗:液体彻底排净后,用10ml蒸馏水,淋洗2次,弃掉流 出液;酱油、食醋样品淋洗:液体彻底排净后,用10mL 0.1%的吐温-20的PBS溶液清洗,弃掉流出液;用10ml蒸馏水,淋洗2次,弃掉流出液;
  d、吹干:利用真空设备,压入空气,将柱子中的水吹干;
  e、洗脱:加入1ml甲醇,调节流速为2-3秒每滴,缓慢洗脱,收集全部洗脱液。
  3、检测:净化后样品可直接用ELISA,荧光和高效液相等方法进行检测。
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