呕吐毒素免疫亲和柱是如何进行样品处理的？
点击次数：656 更新时间：2022-11-30
呕吐毒素，又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇，多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实中, 对人体有一定危害作用，欧盟分类标准为三级致癌物。呕吐毒素免疫亲和柱通过呕吐毒素抗原与抗体的特异性结合，将毒素从样本中选择性分离，从而达到净化的效果。那么对于呕吐毒素免疫亲和柱的样品是如何进行处理的呢？下面我们来详细了解下！
方法一：酒类
取脱气的酒类样品加入聚乙二醇8000，用PBS缓冲液定容；高速均质；用快速定性滤纸过滤，收集滤液；再用微纤维滤纸过滤，并收集滤液作为上样液；取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数：2
方法二：酱油、醋、酱及酱制品；
取样品，加入聚乙二醇8000，用PBS缓冲液定容；高速均质；用快速定性滤纸过滤，收集滤液；再用微纤维滤纸过滤，并收集滤液作为上样液；取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数：2
方法三：粮食及饲料
1.玉米、小麦、面粉、配合饲料、浓缩料、精补料等吸水性较小的样本；
称取粉碎样品，聚乙二醇8000，加入蒸馏水；高速均质；用快速定性滤纸过滤，收集滤液；再用微纤维滤纸过滤，并收集滤液作为上样液；取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数：2
2.麸皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性较强的样本；
称取样品，聚乙二醇8000，加入蒸馏水；高速均质；用快速定性滤纸过滤，收集滤液；再用微纤维滤纸过滤，并收集滤液作为上样液；取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数：2
注意事项：
1.使用前，免疫亲和柱需回至室温(22～25℃)。
2.亲和柱2～8℃储存，不得冻存。
3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
4.取样量：根据需要可以适当增加或减少取样量，注意提取液量要相应改变。
5.pH：亲和柱的上样溶液pH需在6～8之间，若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
6.由于样本中呕吐毒素的含量普遍较高，如果计算后样本含量大于4mg/kg时，表示已经超过亲和柱柱容量，需要适当降低上样液的体积，重新检测。
7.上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
8.呕吐毒素可致癌，应戴手套操作。
9.使用过的容器及标准品溶液最好用次氯酸钠溶液(5%V/V)浸泡过夜。
在线客服