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呕吐毒素免疫亲和柱是如何进行样品处理的?
点击次数:104 发布时间:2022-11-30
  呕吐毒素,又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇,多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实中, 对人体有一定危害作用,欧盟分类标准为三级致癌物。呕吐毒素免疫亲和柱通过呕吐毒素抗原与抗体的特异性结合,将毒素从样本中选择性分离,从而达到净化的效果。那么对于呕吐毒素免疫亲和柱的样品是如何进行处理的呢?下面我们来详细了解下!
 
  呕吐毒素免疫亲和柱的样品处理:
  方法一:酒类
  取脱气的酒类样品加入聚乙二醇8000,用PBS缓冲液定容;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
 
  方法二:酱油、醋、酱及酱制品;
  取样品,加入聚乙二醇8000,用PBS缓冲液定容;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
 
  方法三:粮食及饲料
  1.玉米、小麦、面粉、配合饲料、浓缩料、精补料等吸水性较小的样本;
  称取粉碎样品,聚乙二醇8000,加入蒸馏水;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
  2.麸皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性较强的样本;
  称取样品,聚乙二醇8000,加入蒸馏水;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
  稀释倍数:2
 
  注意事项:
  1.使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25℃)。
  2.亲和柱2~8℃储存,不得冻存。
  3.不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
  4.取样量:根据需要可以适当增加或减少取样量,注意提取液量要相应改变。
  5.pH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
  6.由于样本中呕吐毒素的含量普遍较高,如果计算后样本含量大于4mg/kg时,表示已经超过亲和柱柱容量,需要适当降低上样液的体积,重新检测。
  7.上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
  8.呕吐毒素可致癌,应戴手套操作。
  9.使用过的容器及标准品溶液最好用次氯酸钠溶液(5%V/V)浸泡过夜。

 

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